甲状腺癌是一种常见的内分泌肿瘤

来源:华文易迅 时间:2023-10-02 09:00:02

在女性中，甲状腺癌是一种常见的内分泌肿瘤。有5%~10%的临床甲状腺肿瘤是甲状腺癌[1]。在这些癌症中，90%的分化性甲状腺癌包括甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡状癌，而未分化癌则是罕见的，恶性程度高，预后不良。我国资料表明，我国甲状腺癌发病率显著上升[2]。目前对甲状腺癌相关基因及肿瘤标记的研究进展非常迅速。结果表明[3,4]Bcl-2基因是一种凋亡抑制基因，在滤泡性B细胞淋巴瘤中首次被发现，Bcl-2蛋白能抑制细胞凋亡，延长细胞生存时间。本文应用免疫组织化学方法，以Bcl-2为基础，检测甲状腺癌组织中Bcl-2在甲状腺癌组织中的表达水平。目的：研究Bcl-2在甲状腺癌发生发展中的作用；目的：研究Bcl-2与甲状腺癌生物学行为的关系及预后。

1物质和方法。

1.1原料

所有样本来自2001年至2009年北京大学深圳医院普通外科手术治疗的甲状腺病例，甲状腺癌77例(男性28例，女性8例，平均50例)，甲状腺腺瘤58例，男性22例，女性36例，年平均36名患者，其中40名患癌旁甲状腺组织(男性10例，女性30例，平均37岁)。所有患者均为正常甲状腺组织，经病理证实均未发生甲状腺癌浸润，其中男性9例，女性l9例，平均35岁。用WHO标准对77例甲状腺癌进行组织分类：乳头状癌55例，滤泡状癌l4例，未分化癌8例。临床病理分期：I期30例，Ⅱ期23例，Ⅲ期16例，Ⅳ期8例；Ⅳ期8例；淋巴结转移患者33例，淋巴结转移的患者44例。试样用10%福尔马林液固定，石蜡包埋，常规切片，60℃烘片2h,37℃过夜备用。

1.2免疫组织化学试剂。

抗人单克隆抗体的Bcl-2为美国ZYMED公司产品。SP-9000通用型试剂盒由美国ZYMED公司生产。阳性对照为Bcl-2阳性的扁桃体，PBS替代一抗为阴性空白对照。

1.3测试方法。

片脱蜡、3%H2O2室温处理15min，微波抗原修复，正常羊血室温育30min，滴一抗，4℃保育过夜。滴加生物素标记物的二抗，室温孵育30min，滴加辣根过氧化酶标记链亲和素室温30min,DAB显色。经过苏木精炼，脱水，透明，封口。

1.4判别标准Bcl-2定位于细胞膜和细胞浆，细胞膜和胞浆中呈黄色至深褐色的微粒为阳性。阴性细胞Bcl-2阳性，阳性细胞Bcl-2阳性。由两名病理医生采用盲法阅片，结果不一致时，协调统一判断最终结果。

1.5统计分析。

全部资料经SPSS13.0统计软件包经计算机统计分析后，对其结果进行一系列检验，以P≤0.05为显著差异。

　　2结果

2.1Bcl-2在甲状腺组织中的表达见表1。

Bcl-2阳性反应光镜显示细胞膜和胞浆染色呈棕褐色，而棕色颗粒则无明显变化。Bcl-2阳性率为45.5%，甲状腺腺瘤(22.4%)、癌旁甲状腺组织(17.5%)染色阴性，甲状腺检查阳性率为45.5%。参见表1。

2.2甲状腺癌Bcl-2表达与甲状腺癌相关病理指标之间的关系见表2。Bcl-2表达水平与甲状腺癌组织学类型、淋巴结转移情况及临床病理分期密切相关。如未分化癌和滤泡状癌恶性程度较高，Bcl-2阳性率显著高于低恶性乳头状癌；有淋巴结转移症患者或临床上Ⅲ、Ⅳ期患者；Bcl-2阳性率明显高于相应的无淋巴结转移及临床I、II期病例，差异有显著性(P<0.01)。

　　3讨论

凋亡又称细胞程序化死亡，受基因调控，可分为凋亡抑制基因和凋亡促进基因两个部分，两者此消彼长，共同调节细胞凋亡，对其研究将是解决凋亡机制的基础。但是，其确切的作用机制至今尚未完全阐明。

bcl-2基因家族在凋亡调控中发挥重要作用，是目前研究的热点。Bcl-2基因即B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-celllymphoma/leukemia-2),1984年，Tsujimoto等[5]首次发现并命名为Bcl-2。在18号染色体上，正常长臂2区1区，最初是通过染色体易位(14,18)断裂点的分子克隆法，分离自滤泡状淋巴细胞瘤，为人类滤泡型淋巴细胞瘤的细胞遗传学标记，由2个外显子组成。在人体内的基因产物表达与细胞寿命有关。近几年来，大量研究发现，Bcl-2基因具有抑制细胞凋亡的作用，因此可能与其抗凋亡基因有关[6]。它抑制凋亡的机制，先前的报告一般认为它能阻止凋亡信号传递的最后一条共同途径。本文通过Bcl-2结合蛋白和bcl-2同源蛋白的研究，为进一步探讨bcl-2基因调控细胞凋亡的基础模式提供了新的思路。bcl-2同源蛋白包括ced-9-bcl-xL.bax.bad和ced-9线虫bcl-2.bax能以同二聚体的形式存在，也能形成异二聚体，形成bax同源二聚体，诱导凋亡；bax-bcl-2异二聚体可以抑制凋亡，而且当bcl-xs存在时，优先与bcl-2形成异二聚体。因此，bcl-2在体内游离，形成同二聚体，诱导凋亡，有时bcl-2表达不一定能抑制凋亡。目前普遍认为bcl-2基因表达与肿瘤细胞的分化程度和增殖能力有关，且分化程度较低，具有较强增殖能力的瘤细胞，其bcl-2呈过度表达趋势。本研究中，对甲状腺癌组织中Bcl-2的表达进行系统检测，并对甲状腺癌旁组织和正常甲状腺组织等多种甲状腺组织中进行研究。甲状腺癌组织Bcl-2表达水平为45.5%，与甲状腺腺瘤组织呈正相关，占22.4%。P=0.006)附近甲状腺组织(17.5%,P=0.003)和正常甲状腺组织(0，P=0.000)显示甲状腺腺瘤滤泡上皮细胞bcl-2阳性染色强度和阳性细胞数均明显高于正常甲状腺滤泡上皮细胞，结果表明，Bcl-2可能与调节甲状腺上皮性细胞凋亡相关，与腺瘤的发生密切相关。甲癌中有较多的上皮细胞能够避免凋亡，其发生可能与甲状腺癌的bcl-2蛋白表达过高有关。结果显示，肿瘤组织学类型.年龄、淋巴结转移状况和临床病理分期对甲状腺癌的预后有重要意义[7.8]。本研究结果显示，分化程度极低的未分化癌及滤泡状癌相对较低，结果Bcl-2表达率为100%,78.6%，显著高于Bcl-2乳头状癌(29.1%)，所有病例均有显著差异，如有淋巴结转移，或III.IV期甲状腺癌，Bcl-2在癌组织中的表达显著增强，均有显著差异。甲状腺癌Bcl-2表达于所有类型的甲状腺癌，且其分化程度越低，因此，有理由相信Bcl-2阳性提示甲状腺癌预后不良，且其表达水平越高，其预后越差。甲状腺癌组织Bcl-2高表达与甲状腺癌分化程度、增值浸润、淋巴结转移及预后有密切关系，可作为甲状腺癌预后的重要参考指标。所以，做肿瘤组织Bcl-2的检测和对甲状腺腺瘤患者的阳性病例的密切随访，有一定的指导意义。